技術資料 - 活性 - 高保真(HF)限制性內切酶

高保真限制性內切酶                 收藏

NEB 一直致力于限制性內切酶的研究和改進,現向您提供最新系列的高保真限制性(HF)內切酶。這些酶與其
野生型有相同的特性,在 CutSmart 反應緩沖液中都有活性,但經基因工程改造后降低了星號活性。星號活性
或特異性降低是限制性內切酶的天然特性。大多數酶在推薦條件下反應是不會導致星號活性,然而,對于已報道
有星號活性的內切酶,為避免非特異性切割,一定要按照推薦的反應條件建立反應體系。


很多技術需要在非最佳條件下使用內切酶,如:克隆、基因分型、突變檢測、基因定位、探針制備、測序和甲基
化檢測等。HF 內切酶降低了星號活性,給酶切反應提供更多選擇并能在更多情況下獲得最好的切割效果。


除了降低星號活性外,所有的 HF 內切酶都能在兼容性最強的 CutSmart 反應緩沖液中達到最佳切割效果,因
此簡化雙酶切反應。此外 HF 內切酶全都是省時內切酶,能在 5-15 分鐘內消化底物。HF 內切酶與原酶的價格
相同。

 

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高保真限制性內切酶常見問題解答

 

Q. 為什么 HF 內切酶推薦使用的緩沖液與野生型的內切酶不同?

A. 在許多情況下,突變導致高保真內切酶的最適緩沖液發生變化。比如,野生型 SalI 酶的最適緩沖液 NEBuffer 3.1 是高離子強度緩沖液,然而 SalI-HF 的最適緩沖液為中等離子強度的 NEBuffer 2.1 和 CutSmart。

 

Q. 使用 CutSmart 緩沖液有什么優勢嗎?

A. 是的,超過 200 種限制性內切酶(包括高保真限制性內切酶)在 CutSmart 緩沖液中有活性。當建立雙酶切
反應時有很大優勢。 

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